1 动物细胞培养的无菌准备及主要仪器设备的使用 细胞培养的无菌准备及仪器使用 测试题
1、 问题:下列对灭菌和消毒的理解不正确的是
选项：
A:消毒和灭菌实质上是完全相同的
B:消毒只要求场所与物品达到无害化水平
C:灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
D:常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
E:湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高
答案: 【消毒和灭菌实质上是完全相同的】
2、 问题:下列关于细胞培养用品清洗的说法，不正确的是（）
选项：
A:因器皿的材料、结构、使用方法不同，清洗方法也有区别
B:每次细胞实验使用过的器皿，实验结束后立即泡在清水或洗涤液中。
C:一般玻璃器皿的清洗步骤包括浸泡、刷洗、煮沸和冲洗四个步骤。
D:细胞培养用器皿清洗后要求干净透亮、无油迹、无残留物质。
答案: 【一般玻璃器皿的清洗步骤包括浸泡、刷洗、煮沸和冲洗四个步骤。】
3、 问题:细胞培养实验常用的胰蛋白酶溶液的说话不正确的是（）
选项：
A:胰蛋白酶主要来自牛或猪的胰脏
B:胰蛋白酶主要作用是消化细胞，使细胞间的蛋白质水解，使细胞相互离散。
C:不同的细胞系对胰蛋白酶溶液的浓度、温度和作用时间等要求是一样的。
D:消化细胞时，加入一些血清或含血清的培养液，能够终止胰蛋白酶对细胞的消化作用。
答案: 【不同的细胞系对胰蛋白酶溶液的浓度、温度和作用时间等要求是一样的。】
4、 问题:酒精灯中罐装工业酒精的量的说法不正确的是（）
选项：
A:酒精灯中一般罐装工业酒精的量为灯壶容积的1/3
B:酒精灯中一般罐装工业酒精的量为灯壶容积的1/2
C:酒精灯中一般罐装工业酒精的量为一次性灌满整个灯壶
D:酒精灯中一般罐装工业酒精的量为不超过灯壶容积的2/3
答案: 【酒精灯中一般罐装工业酒精的量为一次性灌满整个灯壶】
5、 问题:鼓风干燥箱的干热灭菌的条件一般是
选项：
A:180℃ ，60min
B:160℃,90-120min
C: 121℃,20 min
D: 121℃,30 min
答案: 【160℃,90-120min】
6、 问题:动物细胞培养用DMEM培养基粉末在溶解时一般会添加一定量的碳酸氢钠粉末。请问在这里碳酸氢钠的主要作用是（）
选项：
A:调节DMEM培养基的pH
B:碳酸氢钠是细胞所必需的营养成分之一
C:培养基酸碱指示剂
D:防止培养基凝固
答案: 【调节DMEM培养基的pH】
7、 问题:制作酒精棉球常用乙醇浓度为()
选项：
A:50%
B: 85%
C:95%
D:75%
答案: 【75%】
8、 问题:动物细胞培养用DMEM培养基进行过滤除菌时可选用的微孔滤膜的孔径为
选项：
A: 0.22μm
B: 0.24μm
C: 0.22μm和0.45μm
D: 0.20μm
答案: 【 0.22μm;
0.22μm和0.45μm】
9、 问题:下列有关动物细胞培养无菌室的清洁与消毒的说法，正确的是
选项：
A: 定期利用乳酸蒸汽对细胞培养间的空气进行消毒
B:细胞实验结束后，需要对使用过的超净工作台台面和细胞间地面进行打扫和0.1%新洁尔灭消毒液进行消毒。
C: 定期利用75%医用酒精和0.1%新洁尔灭消毒液对细胞培养间的空气进行消毒
D: 细胞培养间的地面清洁，通常是先用自来水拖地，再用0.1%新洁尔灭消毒水拖地。
答案: 【 定期利用乳酸蒸汽对细胞培养间的空气进行消毒;
细胞实验结束后，需要对使用过的超净工作台台面和细胞间地面进行打扫和0.1%新洁尔灭消毒液进行消毒。;
细胞培养间的地面清洁，通常是先用自来水拖地，再用0.1%新洁尔灭消毒水拖地。】
10、 问题:下列消毒方法中属于化学消毒法的是（）
选项：
A:75%酒精、
B:次氯酸钠、
C: 高压湿热灭菌
D:干热灭菌
E:0.25μm微孔滤膜过滤
F:紫外线
G: 0.1%新洁尔灭
H: 乳酸蒸汽
答案: 【75%酒精、;
次氯酸钠、;
0.1%新洁尔灭;
乳酸蒸汽】
11、 问题:下列消毒方法中属于物理消毒法的是（）
选项：
A:75%酒精、
B:次氯酸钠、
C: 高压湿热灭菌
D:干热灭菌
E:0.25μm微孔滤膜过滤
F:紫外线
G: 0.1%新洁尔灭
H: 乳酸蒸汽
答案: 【 高压湿热灭菌;
干热灭菌;
0.25μm微孔滤膜过滤;
紫外线】
12、 问题:超净工作台中进行无菌实验操作是应该注意的事项包括（）
选项：
A:手不要在无菌物上方越过；
B:要了解拿无菌物的位置，不触碰其之外的位置；
C:不要将无菌物移出无菌范围
D:通常使用酒精灯, 其火焰周围是无菌区域（直径250px左右）
答案: 【手不要在无菌物上方越过； ;
要了解拿无菌物的位置，不触碰其之外的位置；;
不要将无菌物移出无菌范围;
通常使用酒精灯, 其火焰周围是无菌区域（直径250px左右）】
13、 问题:动物细胞实验常用器皿耗材的包装方法，下面说法正确的是
选项：
A: 细胞实验常用器皿的包装方法分为局部包装和全包装
B:玻璃培养皿的包装采用全包装方法进行包装。
C: 动物细胞实验常用器皿包装，通常使用皱纹纸、包装纸、棉布、报纸等
D:金属器械一般进行独立全包装或用手术器械包进行全包装。
答案: 【 细胞实验常用器皿的包装方法分为局部包装和全包装;
玻璃培养皿的包装采用全包装方法进行包装。;
动物细胞实验常用器皿包装，通常使用皱纹纸、包装纸、棉布、报纸等;
金属器械一般进行独立全包装或用手术器械包进行全包装。】
2 细胞原代培养 细胞原代培养单元测试题
1、 问题:原代培养的目的可能有哪些？（）
选项：
A:建立新的细胞系；
B:使用不能长期传代的细胞时通常通过原代培养获得细胞
C:原代培养细胞可以无限传代培养
D:原代培养可以服务于临床实践
答案: 【建立新的细胞系；;
使用不能长期传代的细胞时通常通过原代培养获得细胞;
原代培养可以服务于临床实践】
2、 问题:原代培养细胞的特点主要有（）
选项：
A:原代培养细胞往往由多种细胞组成 比较混杂
B:原代培养的细胞生物特性尚不稳定
C:原代培养的细胞一般进行短期的传代培养后方可进行实验
D:原代培养的细胞可以无限传代
答案: 【原代培养细胞往往由多种细胞组成 比较混杂;
原代培养的细胞生物特性尚不稳定;
原代培养的细胞一般进行短期的传代培养后方可进行实验】
3、 问题:细胞原代培养实验操作过程对于取材的基本要求（）
选项：
A:保鲜尽量在4～6 h内分离出细胞
B:保证严格无菌
C:用锋利的器械切碎组织
D:要去除材料上的血液 脂肪坏死组织及结缔组织
E:尽量选用容易培养的组织
答案: 【保鲜尽量在4～6 h内分离出细胞;
保证严格无菌;
用锋利的器械切碎组织;
要去除材料上的血液 脂肪坏死组织及结缔组织;
尽量选用容易培养的组织】
4、 问题:适合做原代培养的材料有（）
选项：
A:鼠胚和鸡胚
B:成体小鼠
C: 小鼠胃癌组织
D: 成体小鸡
答案: 【鼠胚和鸡胚;
小鼠胃癌组织】
5、 问题:D-Hanks液是无钙镁离子的Hanks液
选项：
A:正确
B:错误
答案: 【正确】
6、 问题:鼠胚原代培养实验常用孕鼠一般为15~18日龄孕鼠
选项：
A:正确
B:错误
7、 问题:鼠胚原代培养过程中一直是正常培养，没有翻转培养一说
选项：
A:正确
B:错误
答案: 【错误】
8、 问题:通常将取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为细胞原代培养
选项：
A:正确
B:错误
答案: 【正确】
9、 问题:细胞系指的是从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞在培养条件下可无限繁殖此时的细胞
选项：
A:正确
B:错误
答案: 【正确】
3 细胞传代 细胞传代单元测试题
1、 问题:体外培养细胞，可通过下面哪些方法进行确定细胞传代的时间？（）
选项：
A:肉眼观察培养瓶内的培养基的颜色，颜色变为黄色时，及时进行细胞传代
B:根据传代后的培养时间直接确定是否进行细胞传代
C:肉眼观察培养瓶内的培养基的颜色，颜色变为橘色时，培养基已经不适用于细胞生长
D:肉眼观察培养瓶内的培养基的颜色，颜色变为橘色时，培养基已经不适用于细胞生长
答案: 【肉眼观察培养瓶内的培养基的颜色，颜色变为黄色时，及时进行细胞传代】
2、 问题:有关完全培养基中胎牛血清的说法正确的是（）
选项：
A:提供对维持细胞指数生长的激素，基本培养基中没有或量少的营养物以及低分子营养物质；某些情况下结合蛋白质能与有毒金属结合，起到解毒作用；细胞贴壁、铺展所需因子的来源
B:胎牛血清也可以用合成的血清替代
C:胎牛血清是血清中的一种，在细胞体外培养基中可加也可不加
D:血清和胰蛋白酶的作用相反
答案: 【提供对维持细胞指数生长的激素，基本培养基中没有或量少的营养物以及低分子营养物质；某些情况下结合蛋白质能与有毒金属结合，起到解毒作用；细胞贴壁、铺展所需因子的来源】
3、 问题:细胞传代实验操作的中的实验步骤包含（）
选项：
A:实验前前准备，紫外灯消毒超净工作台，试剂准备
B:胰蛋白酶溶液进行细胞消化
C:重悬细胞后，补加培养基，分瓶培养
D:显微镜观察细胞生长状态，确认是否进行传代操作及分瓶培养的比例
答案: 【实验前前准备，紫外灯消毒超净工作台，试剂准备;
胰蛋白酶溶液进行细胞消化;
重悬细胞后，补加培养基，分瓶培养;
显微镜观察细胞生长状态，确认是否进行传代操作及分瓶培养的比例】
4、 问题:DMEM完全培养基成分一般包括（）
选项：
A:90%DMEM基本培养基
B:10%胎牛血清
C:青霉素链霉素抗生素
D:10% DMSO
答案: 【90%DMEM基本培养基;
10%胎牛血清;
青霉素链霉素抗生素】
5、 问题:动物细胞体外培养时，根据细胞在培养皿里生长的状态，可以分为3种类型的细胞，分别为（）
选项：
A:贴壁型细胞
B:半贴壁型细胞或半悬浮型细胞
C:悬浮型细胞
D:神经细胞
答案: 【贴壁型细胞;
半贴壁型细胞或半悬浮型细胞;
悬浮型细胞】
6、 问题:下面为学生进行细胞传代时的操作，正确的操作有（）
选项：
A:细胞传代开始前，现将需要的一次性培养皿、吸管、移液管等耗材放入超净工作台，紫外灯消毒30min
B:细胞传代前，将培养基、血清、胰蛋白酶溶液从低温取出，放在操作台使它们慢慢恢复室温或者直接放入37℃水浴锅中预热
C:消化细胞时可以在镜下观察观察细胞消化过程，避免消化过，影响细胞状态
D:消化细胞时也可根据经验值，直接消化一段间之后，带着消化液，补加培养基后进行分瓶培养
答案: 【细胞传代开始前，现将需要的一次性培养皿、吸管、移液管等耗材放入超净工作台，紫外灯消毒30min;
细胞传代前，将培养基、血清、胰蛋白酶溶液从低温取出，放在操作台使它们慢慢恢复室温或者直接放入37℃水浴锅中预热;
消化细胞时可以在镜下观察观察细胞消化过程，避免消化过，影响细胞状态】
4 细胞冻存 细胞冻存单元测试
1、 问题:下面有关细胞冻存过程的说法，正确的是（）
选项：
A:冻存液中含有10%DMSO
B: 细胞冻存的原则是快速冻存
C:冻存液中含有10%血清
D:细胞冻存后再进行复苏培养时，几乎没有细胞损伤。
答案: 【冻存液中含有10%DMSO】
2、 问题:采用梯度降温方法进行细胞冻存的过程时，下面说法正确的是（）
选项：
A: 梯度降温程序：4℃，10 min;-20℃，30 min ；-80℃，过夜；转移到-196℃长期保存
B:梯度降温程序：4℃，10 min;20℃，30 min ；-80℃，过夜；转移到-196℃长期保存
C:梯度降温程序：4℃，10 min;-20℃，30 min ；转移到-196℃长期保存
D:梯度降温程序：4℃，10 min;-20℃，30 min ；转移到-80℃长期保存
答案: 【 梯度降温程序：4℃，10 min;-20℃，30 min ；-80℃，过夜；转移到-196℃长期保存】
3、 问题:将冻存细胞存入或取出液氮罐过程中，有关需要注意的操作的说法正确的是（）
选项：
A:操作时应注意佩戴防护手套和实验服或防护服以免冻伤，轻拿轻放
B:由于液氮罐中温度低，存取冻存细胞时，注意快速取放，以免冻伤
C:由于液氮罐中温度低，存取冻存细胞时，注意快速取放，因此无需佩戴防护手套
D:向液氮罐中存取细胞时，可以用手直接存取细胞冻存管
答案: 【操作时应注意佩戴防护手套和实验服或防护服以免冻伤，轻拿轻放】
4、 问题:下面试剂可作为细胞冻存液冻存细胞的是（）（
选项：
A:二甲基亚砜
B:DMEM
C: 氯仿
D:PBS缓冲液
答案: 【二甲基亚砜】
5、 问题:细胞冻存液的成分包括（）
选项：
A:70%DMEM基本培养基，20%血清，10%DMSO
B:70%DMEM完全培养基，20%血清，10%DMSO
C: 80%DMEM完全培养基，10%血清，10%DMSO
D:70%DMEM完全培养基，10%血清，20%DMSO
答案: 【70%DMEM基本培养基，20%血清，10%DMSO】
6、 问题:下面有关细胞冻存的目的和意义的说法，正确的是（）
选项：
A:细胞长期保存的一种方法，起到保持尽量少的传代次数和较均一的细胞状态
B:减少人力、经费投入，减少污染，减少细胞生物学特性变化
C:有利于保存那些不立即使用的细胞系
D: 细胞冻存耗时耗力，不建议扩大推广
答案: 【细胞长期保存的一种方法，起到保持尽量少的传代次数和较均一的细胞状态;
减少人力、经费投入，减少污染，减少细胞生物学特性变化;
有利于保存那些不立即使用的细胞系】
7、 问题:有关细胞冷冻保护剂在冻存过程中岁温度的降低而发生的变化，下面说法正确的是（）
选项：
A:当使用纯水多作为细胞冷冻保护剂的话，随着温度的降低，细胞内外水分会结冰，形成冰晶破坏细胞膜。
B:当使用一般的溶液作为细胞冷冻保护剂的话，随着温度的降低，细胞内外水分会结冰，导致溶液的电解质浓度升高，此时细胞容易发生渗透。
C:当使用DMSO或甘油作为细胞冷冻保护剂时，随着温度的降低，保护剂与水分子结合，降低冰点，减少冰晶的形成，降低未结冰溶液的电解质浓度，使细胞免受溶质损伤和冰晶损伤。
D:细胞冻存时，选择好冷冻保护剂后，无需考虑其他影响因素，直接进行细胞冻存就可以。
答案: 【当使用纯水多作为细胞冷冻保护剂的话，随着温度的降低，细胞内外水分会结冰，形成冰晶破坏细胞膜。;
当使用一般的溶液作为细胞冷冻保护剂的话，随着温度的降低，细胞内外水分会结冰，导致溶液的电解质浓度升高，此时细胞容易发生渗透。;
当使用DMSO或甘油作为细胞冷冻保护剂时，随着温度的降低，保护剂与水分子结合，降低冰点，减少冰晶的形成，降低未结冰溶液的电解质浓度，使细胞免受溶质损伤和冰晶损伤。】
8、 问题:细胞冻存及复苏过程中，哪些因素会影响细胞冻存的效果（）
选项：
A:冷冻保护剂
B:冷冻速率
C: 冷冻温度
D: 细胞复温速率
答案: 【冷冻保护剂;
冷冻速率;
冷冻温度;
细胞复温速率】
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